溶血性鏈球菌檢測機構
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298 鏈球菌常根據其在血瓊脂培養基上溶血環的大小，分為甲、乙、丙三型。其中乙型溶血性鏈球菌具有完全的溶血性，菌落周圍形成一個2-4mm寬、界限分明、完全透明的無色溶血環，這類細菌稱為溶血性鏈球菌。
溶血性鏈球菌在自然界中分布較廣，是一種常見的病原微生物，呈球形或橢圓形，直徑0.6-1.0μm，呈鏈狀排列，長短不一，從4-8個至20-30個菌細胞組成不等，鏈的長短與細菌的種類及生長環境有關。該菌不形成芽孢，無鞭毛，易被普通的堿性染料著色，革蘭氏陽性，需氧或兼性厭氧菌，營養要求較高。下面就將對溶血性鏈球菌的檢測進行詳細介紹。
溶血性鏈球菌檢測項目
關于溶血性鏈球菌，可對其β-溶血素、抗酸性酶、蛋白酶、DN酶、酰胺酶、葡萄糖酸激酶、血清型、絲狀素、抗原、核酸酶、羥丁酸脫氫酶、四醇激酶、尿素酶、乳酸脫氫酶、小分子蛋白質、外毒素、PG豁免物、分子情況、脫氧瓊脂糖酶、重組毒素提供等檢測項目。
同時可對α型鏈球菌、β型鏈球菌、γ型鏈球菌、δ型鏈球菌、ε型鏈球菌、ζ型鏈球菌、弧菌屬、葡萄球菌屬、鏈霉菌屬、放線菌屬、肺炎鏈球菌、嗜血桿菌屬、流感嗜血桿菌、鏈球菌屬、環球菌屬、葡萄鏈霉菌屬、巨大微球菌屬、鼠疫桿菌屬、麻風桿菌屬等進行檢測。
溶血性鏈球菌檢測方法
1、樣品處理：取25g固體（或25mL液體）檢樣加入225mL滅菌生理鹽水，制成混懸液。
2、吸取5mL混懸液接種至50mL葡萄糖肉浸液肉湯，或直接劃線于血平板（如檢樣污染嚴重，可同時接種5mL至匹克氏肉湯），36℃培養24h，接種血平板，36℃培養24h,挑起乙型溶血圓形突起的細小菌落，在血平板上分純，觀察在液體和固體中的培養特征、溶血情況及革蘭氏染色、形態，并進行鏈激酶試驗和桿菌肽敏感試驗。
3、鏈激酶試驗：吸取草酸鉀血漿0.2mL，加0.8mL滅菌生理鹽水，混勻，再加入鏈球菌18-24h 36℃肉浸液肉湯培養物0.5mL及0.25%氯化鈣0.25mL，混勻，置于36℃水浴10min，血漿混合物自行凝固，觀察凝塊重新完全溶解的時間，完全溶解為陽性，如24h后不溶解即為陰性。同時用肉浸液肉湯做陰性對照，用已知的鏈激酶陽性的菌株做陽性對照。
4、桿菌肽敏感試驗：取典型菌落的菌液涂布于血平板上，用滅菌鑷子夾取每片含有0.04單位的桿菌肽紙片置于上述平板上，36℃培養18-24h，如有抑菌圈出現即為陽性。用已知的陽性菌株做對照。
溶血性鏈球菌檢測標準(部分)
1、DB15/T 2071-2021 動物墊料中β-溶血性鏈球菌檢測
2、GB/T 18203-2000 室內空氣中溶血性鏈球菌衛生標準
3、GB/T 14926.16-2001 實驗動物 乙型溶血性鏈球菌檢測方法
4、GB/T 4789.11-2003 食品衛生微生物學檢驗 溶血性鏈球菌檢驗
5、SN/T 4972-2017 國境口岸溶血性鏈球菌實時熒光PCR檢測方法
6、GB 4789.11-1994 食品衛生微生物學檢驗 溶血性鏈球菌檢驗
7、SN/T 4624.5-2016 入境環保用微生物菌劑檢測方法 第5部分：β型溶血性鏈球菌
8、GB 4789.11-2014 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 β型溶血性鏈球菌檢驗
9、T/NAIA 0290-2024 一次性使用衛生用品中溶血性鏈球菌檢驗 實時熒光PCR法
10、DB51/T 1710.13-2013 大熊貓檢疫技術—β-溶血性鏈球菌的實驗室檢測技術規范
11、SN/T 2754.9-2011 出口食品中致病菌環介導恒溫擴增（LAMP）檢測方法.第9部分：溶血性鏈球菌
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